动物模型,肿瘤 中国实验动物信息网 2020-07-17 4446

肿瘤动物模型的建立方法

　　将对数生长的肿瘤细胞收集 ， 用无血清基质 10.0ml， 于 1500 转/ 分， 离心3min， 连续洗 3 次， *后用无血清基质混匀， 用血球计数器计算肿瘤细胞数量( 平均 5 个中方格的细胞计数×104即是肿瘤数/ 毫升) 。 计算完肿瘤细胞总数， 再将 肿瘤细胞密度调至 4×106 个/ml， 每只小鼠腋下接种 50ul(即 2×105个肿瘤细胞)， 2周左右可扪及肿瘤小节结。一般选取 6-8 周的小鼠，不同的肿瘤细胞接种的数量和动物不一样， 比如 LL/2，B 16， Hep 可接种 C57 和 BAL B/C 小鼠， NS-1，EL-4， C26，Meth A 可接种 BAL B/C 小鼠， H22接种昆明鼠。从肿瘤接种后可扪及小结节开始， 每 3 天用游标卡尺量肿瘤纵横大小( 单位：mm)， 至少连续一个月时间。

　　注意要设计不同的实验组和对照组， 每组动物数一般为 5-10 只， 一般接种肿瘤6-8 周后，小鼠的肿瘤可生长至直径为 15-20mm ( 即小鼠会濒临死亡) 时， 可眼球取血，分离血清并保存血清， 处死小鼠， 取肿瘤组织照相， 取部分肿瘤组织作 冰冻组织切片( 或- 80℃ 保存)， 作相应的免疫组织化学染色 ， 取部分肿瘤组织用3%中性的甲醛固定， 石腊包埋， 作常规HE 染色。