CRISPR 中国实验动物信息网 2020-09-18 1781

　　肠上皮是人体中*快的细胞再生组织，可以快速再生和修复肠粘膜，但这种能力也存在一定风险。已知肠道中的隐干细胞会引发肿瘤发生，并在肿瘤细胞的分化，增殖和凋亡中发挥重要作用。

　　含有干细胞巢蛋白（WNT，R-spondin，上皮生长因子EGF）的培养基可用于培养小鼠和人类肠道干细胞更长的时间，以产生遗传和表型稳定的上皮类器官。荷兰艺术学院和皇家科学院院长，美国国家科学院院士汉斯·克莱弗斯（Hans Clevers）教授带领一个研究小组，利用CRISPR/Cas9技术建立了结肠癌（CRC）类器官。

　　这项研究的结果本周发表在《自然》杂志上。大肠癌通常由腺瘤缓慢发展。这意味着大肠癌的发展可能是不断获得基因突变的过程。研究人员已将CRISPR/Cas9技术应用于体外培养的人肠道干细胞，以引入四种*常见的结直肠癌基因突变（APC，P53、KRAS和SMAD4）。他们通过从培养基中去除生长因子来筛选突变的细胞。根据研究，具有四重突变的细胞可以在没有干细胞巢蛋白的情况下增殖，并且可以耐受肿瘤抑制因子Nutlin-3、这些细胞移植到小鼠后，它们长成侵袭性肿瘤。值得注意的是，APC和P53突变足以引起广泛的染色体异常（异质性），这是肿瘤发生的特征。

　　不久前，研究团队使用类似方法通过CRISPR系统引入了突变，以建立结肠直肠癌模型。 Clevers指出，当他们筛选突变细胞和所有针对突变热点的sgRNA时，他自己的结肠直肠癌发展模型可以更紧密地反映体内的肿瘤发生。