目的:如何研究三七总皂苷(PNS)及其单体Rg1的保护作用?b1影响由氧葡萄糖剥夺(OGD)引起的血管内皮紧密连接损伤。
方法:将HUVEC细胞接种在Transwell细胞室中,细胞融合后,建立实验组:正常对照组?模型组? PNS10、20、40 mg/L组和Rb113.52 mg/L,Rg112.44 mg/L组同时,在缺氧,缺氧和缺糖6小时以及重新充氧24小时进行药物治疗检测了荧光后HUVEC内皮细胞抵抗力和内皮通透性的变化;使用激光共聚焦显微镜和免疫荧光检测了HUVEC细胞ZO-1?。 claudin-5蛋白表达的变化。
结果:缺氧6小时和复氧24小时后,HUVEC细胞内皮细胞之间的紧密连接阻力明显降低,与正常对照组相比,细胞通透性显着提高。它增加了(P\u003c0.05)。在模型组中,PNS20和40 mg/L组可显着抑制紧密连接电阻的降低和HUVEC细胞通透性的提高(P\u003c0.05)。人参皂苷Rb1可以在OGD6h复氧24小时后显着增加内皮紧密连接抗性并降低HUVEC细胞通透性(P\u003c0.05)。免疫荧光试验结果表明,正常对照组中HUVEC细胞的ZO-1和claudin-5蛋白主要分布在细胞膜周围并连续排列,这是内皮细胞的典型特征。显示典型的铺路石布置。缺氧6小时和复氧24小时后,模型组细胞边缘的紧密连接蛋白显着减少,环结构被破坏或消失,细胞核中的紧密连接蛋白趋于增加。它是PNS20、40 mg/L和Rb113.52 mg/L可以观察到细胞之间紧密连接的局部恢复,并显示出类似鹅卵石的结构。
结论:PNS可有效保护缺血引起的血管内皮细胞之间的紧密连接损伤。