动物造模,原代小肠上皮细胞模型 中国实验动物信息网 2021-10-14 1005

　　目的：研究原发性树肠上皮细胞的增殖特性，建立人可旋转的G1P [8]病毒在树的原发性肠上皮细胞中感染的细胞模型。

　　方法：通过消化胶原酶XI和中性蛋白酶I的组合，获得了树的小肠的原代小肠上皮细胞。纯化和鉴定后，将细胞感染人旋转G1P [8]病毒，并测量培养上清液的病毒滴度。通过Westernblot和间接免疫荧光检测法检测人轮状病毒G1P [8]型VP6蛋白的表达，并在体外评估人轮状病毒G1P [8]型病毒对原代小肠上皮细胞的感染性。完成了。

　　结果：分离的树木小肠原代小肠上皮细胞通过继代培养纯化，得到的树枝原代小肠上皮细胞纯度为90％。比较了树枝的原代小肠上皮细胞，原代肾细胞，HCT116和MA104细胞的轮状病毒敏感性，并确定了人类的轮状病毒G1P可以感染树枝的原代小肠上皮细胞[8]。 ]。培养72小时后，病毒滴度可达到2.0 x 105 TCID 50/mL。 Western印迹和间接免疫荧光显示，在轮状病毒G1P [8]病毒感染1-5天的葡萄树的小肠上皮细胞中，可以检测到轮状病毒VP6蛋白的表达和分布。

　　结论：建立了分离，纯化和培养树sh原代小肠上皮细胞的方法，并建立了人轮状病毒G1P [8]病毒感染树sh原代小肠上皮细胞的体外模型。