自Rygaard和Povlsen于1969年首次成功将切除的人类癌组织标本移植到裸鼠体内以来,移植的肿瘤模型已在肿瘤生长和转移研究中得到了更广泛的应用。 ..建立CRC异种移植动物模型的常用方法包括细胞移植和组织移植,根据不同的接种部位,它们可分为异位皮下移植和原位移植。建立移植的肿瘤模型时,无胸腺裸鼠或严重的联合免疫缺陷SCID小鼠通常用于减少排斥反应。 [建模机制]使用人或动物来源的标准细胞系或组织块直接接种或移植到免疫缺陷的裸鼠或SCID小鼠中。荷瘤小鼠不会排斥同种异体或异种组织和器官,因为移植的肿瘤保留了其原始组织结构或功能,肿瘤病因,病因,免疫学,药理学和治疗学广泛用于研究。
[建模方法]
1、在皮下移植肿瘤模型中,在无菌条件下取出大量人类肿瘤组织,并在治疗后,在RPMI1640溶液中切成1-2毫米的小块,或直接用于产生标准的结肠癌细胞系。制作并制作单细胞悬液(5 x 100000000?2.5 x 100000000000/L)皮下植入裸鼠,植入部位为颈部,腋窝,背部,腹股沟,胸壁,颈部等。生长*快。每天观察直到肿瘤达到1.0 ?,将裸鼠处死1.5 cm,并按照上述方法取出肿瘤组织或细胞并传代。
2、原位异种移植肿瘤模型通常使用皮下异种移植肿瘤模型使稳定通过的肿瘤组织通过,将其切成1毫米直径的片,以备后用。通过腹腔麻醉实验动物。皮肤消毒后,在腹部切开腹部切口,从盲肠拔出,刮下小的浆液组织,将1立方毫米的肿瘤组织缝合到受伤的浆膜上,或将肿瘤块直接插入病变处。在浆膜中形成凹槽,并在肿瘤表面上滴一滴OB粘合剂以固定肿瘤。将盲肠放回腹部,并逐层关闭腹部。或者,通过直肠-直肠粘膜直接注射肿瘤细胞可以减少麻醉和手术创伤,以及对小鼠免疫系统和肿瘤细胞生长的影响。
3、结肠造口术模型是通过结肠造瘘术移植实验小鼠,然后接种肿瘤细胞或结肠粘膜下层,观察肿瘤的生长和转移。常规步骤:麻醉小鼠后,在左腹部皮肤和腹膜上做一个小切口,将盲肠抬高至腹壁上方约0.5 cm,然后缝合盲肠以将其固定在周围皮肤上。 23天后您可能会结have。 CRC细胞或组织可以接种到造口结肠粘膜下层。 [模型特性]由于不同移植模型的细胞系的肿瘤形成率,肿瘤生长和转移率不一致,因此在CRC肿瘤模型的研究中,应尽可能在人类中使用转移率高的细胞系。需要更好地模拟。 CRC开发的自然过程。表7-4显示了由不同接种方法和接种位置引起的模型特征。此外,还有其他人类结肠癌细胞系,例如HT29,SW480,SW620和小鼠结肠癌细胞系TCM37,CT26、MCA38。同系小鼠的接种可以建立移植肿瘤模型。
[模型的评估和应用]
1、皮下移植瘤模型是建立皮下移植瘤模型的*简单手术,具有较高的肿瘤形成率。虽然方便实时监测肿瘤生长并评估治疗效果,但很难真正模拟人CRC的原位生长,也很难显示出肿瘤侵袭和转移的恶性。特征;但是,也有报道称SCID小鼠的皮下肿瘤有肺转移,原位细胞和组织移植可以更好地弥补这一点。
2、原位移植肿瘤模型原位细胞和组织移植可以完全模拟CRC的发生,发展和转移的过程,使其成为研究人类CRC发病机理,转移和新疗法的理想动物模型。优惠。将原位组织移植模型与原位细胞移植模型进行比较。所得的恶性肿瘤组织具有完美的细胞表面结构,良好的细胞间协同作用,原位移植的高致瘤性,并能更好地反映原位生长和转移。能力是目前临床上*相似的肿瘤动物模型,使其成为建立CRC动物模型的*常用方法之一。但是,该方法的操作过程复杂,要求高且耗时。麻醉和手术会对裸鼠造成巨大伤害。手术后可能会出现肠梗阻,从而导致模型衰竭。观察肿瘤的生长并不容易。观察肿瘤的生长情况和干预效果。
3、结肠造口术模型的优点是肿瘤位于身体表面,易于观察,重复取样和种植以进行评估。如果不成功,可以重复补植,减少动物使用。缺点也是手术的难度和对小鼠的巨大伤害。