动物造模,RSC96 中国实验动物信息网 2021-01-29 977

　　目的：观察条件培养基对大鼠雪旺细胞株RSC96细胞（RSC96-CM）对少突胶质祖细胞（OPC）增殖的影响，并探讨其作用机理。

　　方法：通过免疫粘附法在15天内从SD大鼠的胚胎脊髓中分离出OPC，通过BrdU摄取实验检测OPC的增殖，并在RSC96细胞中进行RT-PCR，检测PDGF-AA和bFGF的表达。使用ELISA技术检测RSC96-CM中PDGF-AA和bFGF蛋白的水平，观察PDGF-AA和bFGF对RSC96-CM诱导的特异性抑制剂对OPC生长的影响，并观察ERK和JNK信号观察该途径的影响。SC96-CM在诱导某些抑制剂OPC生长中的作用。

　　结果：与对照组相比，以不同浓度的RSC96-CM培养的OPC的BrdU +细胞比例显着增加（P\u003c0.05）。其中，在含有50％RSC96-CM的培养基中培养的OPC在BrdU +细胞比例显着增加时达到峰值。T-PCR证实RSC96细胞显着表达PDGF-AA和bFGF mRNA。根据ELISA结果，发现RSC96-CM的PDGF-AA和bFGF的蛋白质浓度为0.87，这是B104CM的PDGF-AA和bFGF的蛋白质水平。以前的报告。次和0.92次。 PDGFRAG1295的特异性抑制剂和bFGFRPD173074的特异性抑制剂均显着降低RSC96-CM诱导的OPC增殖。此外，Erk1/2特异性抑制剂U0126和JNK特异性抑制SP600125的预孵育，也显着降低RSC96、 -CM诱导的BrdU + OPC比（P\u003c0.01）。

　　结论：RSC96-CM通过RSC96分泌的PDGF-AA和bFGF显着诱导OPC增殖并激活Erk 1/2和JNK信号通路。SC96-CM也可用作常规培养物中的扩增剂。