动物造模,急性溃疡性结肠炎动物模型 中国实验动物信息网 2021-11-15 2352

　　（1）繁殖方法腹膜内注射戊巴比妥钠麻醉成年雄性大鼠，禁食16小时，禁水，将聚乙烯导管从距肛门8cm处的结肠中缓慢插入1.5至2ml的8％乙酸溶液中。20秒后注入，注入5 ml的生理盐水并重复冲洗3次。灌肠后，观察动物的日常活动并记录体重，腹泻和血便。十天后，处死动物并肉眼观察结肠粘膜的变化。收获材料并将其固定在10％甲醛溶液中。通过光学显微镜和免疫组织化学技术检查结肠粘膜的组织形态变化。肿瘤坏死。测量结肠粘膜的因子α（TNF-α）。

　　（2）模型特征灌肠1-3天后，动物表现出呆滞的头发，懒惰，卷发，饮食减少，体重减轻，并开始出现各种程度的血性腹泻。十天后，尸检和观察显示乙状结肠和直肠上方降结肠持续水肿，肠壁明显增厚，导管壁坚硬，粘膜表面弥漫性出血点，红斑，可见水肿。结肠粘膜上皮具有弥散和溃疡，粘膜下水肿，血管充血，隐窝脓肿，杯状细胞耗竭，中性粒细胞弥散性和淋巴细胞浸润在适当的层中，并且这些细胞是基本的和未成熟的细胞。粘膜TNF-α升高，IL-10降低。

　　（3）比较医学溃疡性结肠炎（UC）是结肠粘膜的一种慢性炎性和溃疡性疾病。*典型的临床特征是血性腹泻。病理变化主要表现为粘膜上皮细胞，毛细血管阻塞，固有层性浆细胞，嗜酸性粒细胞，淋巴细胞，肥大细胞和中性粒细胞下的网状纤维化。性浸润，隐窝脓肿，坏死导致上皮和粘膜溃疡。通过将乙酸注射到动物的直肠中，可以更好地模拟上述症状和病理症状。其机理是利用乙酸的化学刺激来引起结肠粘膜屏障结构的破坏，从而引起炎症和细胞坏死。使用乙酸肠灌注，模型动物会出现不同程度的血性腹泻，乙状结肠和降结肠具有持续的水肿，上皮刺激，隐窝脓肿和固有层中性粒细胞扩散，表现出球形和淋巴细胞浸润。另外，该模型动物的结肠粘膜增加了TNF-α而降低了IL-10，类似于人UC患者的临床表现。有证据表明免疫因子是参与UC发展的重要因素，其中细胞因子起着不可忽视的作用。其中，TNF-α和IL-10在UC的病因中起积极作用。 TNF-α主要由活化的单核细胞-巨噬细胞产生。它是具有多种生物学活性的细胞因子。级联反应会在发炎区域积聚白细胞，刺激单核细胞，血管内皮细胞等产生细胞因子，诱导细胞因子合成，并*终导致组织损伤。 IL-10被称为细胞因子合成抑制剂，主要由单核细胞和巨噬细胞产生。它的主要功能是抑制单核细胞，巨噬细胞，嗜中性粒细胞和T细胞的活化，这些活化在mRNA水平上得到有效抑制。抑制激活。单核细胞产生IL-18，IL-6、IL-8，TNF-α和其他促炎性细胞因子，它们在调节肠道的免疫平衡中起重要作用。醋酸灌肠用于复制溃疡性结肠炎的动物模型，醋酸的浓度和在结肠中的停留时间是重要的技术。通常，ψ（乙酸）= 4％至10％，*常见的暴露时间为15至30秒。该模型制造方法简单，成本低，周期短，明显的症状特征和典型的病理症状。患病组织中的细胞因子水平与人类UC患者相似。它是当今使用*广泛的实验性UC模型之一、用于UC病因和活性物质的筛选和功效评估。然而，乙酸直接刺激结肠粘膜所引起的损害是非特异性炎症，这是急性过程，不能表现为人UC的慢性和复发性特征，从而导致对模型动物的急性损害。在3周内自发愈合。如果不足，该模型的应用将受到限制。