动物造模,肝硬化动物模型 中国实验动物信息网 2022-02-05 2020

　　（1）复制方法成年雄性大鼠每周两次腹膜内注射2 ml/kg体重的30％CCl4石蜡油溶液，持续7周。或者，每3天皮下注射40％CCL4大豆油溶液3 ml/kg体重，初始剂量5 ml/kg体重，每3天一次，共14次，然后在头2周内喂食80％玉米粉实验开始时，使用20％的猪油混合物，两周后将0.5％的胆固醇与饲料混合，并在42天之内使用30％的乙醇作为唯一的饮料。或者，皮下注射50％CCl4大豆油溶液3 ml/kg体重，初次给药5 ml/kg体重，从第5天更改为每4天一次，肌注，共15次，期间饮用10％乙醇在60天内连续吃些普通的颗粒饲料，而不要在里面喝水。或者，每4天皮下注射3-5 ml/kg体重的60％CCl4矿物油溶液，共15次。前4次重5毫升/千克，5-11次重3毫升/千克。体重的12到15倍是5毫升/公斤体重，连续10天使用10％的乙醇作为唯一的饮用水。建模过程包括每天观察动物的一般活动，每周称重动物，建模后收集全血以制备血清，称重肝组织以进行生化测试，准备肝和脾等器官的匀浆并提取器官。测量器官系数并进行组织学形态学检查。

　　（2）模型特征在模型观察过程中，模型动物呆滞，厌食，嗜睡，肠易激，有时会咬人并发动攻击，*初会减轻体重，然后逐渐增重。腹膜内注入30％CCl4溶液的动物接受了血清丙氨酸氨基转移酶（ALT），总蛋白（TP），球蛋白（GLO），总胆固醇（TC），三酰基甘油（TG）和TC，TG，L-的含量为如图所示。肝组织中羟脯氨酸（HPA）明显增加，而血清白蛋白（ALB）含量和白蛋白/球蛋白比（A/G）明显降低。在光学显微镜下出现所有模型动物的肝组织。纤维化，大多数形成假小叶。在电子显微镜下，模型动物的肝细胞超结构明显异常，肝细胞不同程度地肿胀，一些肝细胞膜破裂，内质网扩张并被破坏，并且有大量的脂质，在天空中有一些常见的区域，即线粒体基质电子密度增加，the消失，中性粒细胞在肝窦中更常见。连续42-66天皮下注射40％，50％和60％的CCl4溶液，动物成活率为46％-77％，肝硬化模型成功率为72％-100％。成年动物的正常肝组织被破坏，原始的肝小叶被大量增殖的纤维组织分开，并包裹成各种大小的圆形以形成假小叶。肝细胞索在假小叶中的排列混乱，小叶中无或偏离中心静脉，或出现两个或多个中心静脉，并随机放置了再生的肝细胞结节，细胞体大，核大且染色深。发生气泡和脂肪变性。

　　（3）比较医学CCl4是在动物模型中诱发肝硬化的*早且使用*广泛的化学物质。 CCl4被肝线粒体细胞色素P450激活以产生四氯化碳（CCl3）。它攻击肝细胞膜结构上的磷脂，引起脂质过氧化并破坏细胞膜结构。 CCl3还与细胞内蛋白形成共享关系。它会损伤线粒体，减少肝脏中还原酶A（NADH）和三磷酸腺苷（ATP）的产生，抑制脂肪酸氧化，影响三羧酸循环，并“窒息”肝细胞，让我死亡。甚至高尔基体和细胞膜的变形和破坏也会导致蛋白质合成，能量代谢和脂质氧化受损。三酰甘油和脂肪酸在肝细胞中积累，导致脂肪变性，肝细胞坏死和纤维化。高浓度的CCl4主要影响中枢神经系统。反复使用低浓度会损害肝脏和肾脏。肝损伤修复损伤*终会导致肝硬化。 CCl4用于诱导肝硬化模型，通常以30％至60％的浓度作为模型溶液，大鼠用作模型对象，皮下或腹膜内注射，管饲，蒸汽吸入或动物。其中，皮下注射是*常用的方法，但由于其迅速吸收到体循环中，因此皮下注射对脑和肾脏更具毒性，并且注射部位是侵袭性脓肿和溃疡，死亡率高达30岁。 ％至40％；由于腹膜内注射门静脉高浓度，模型形成时间短，但动物死亡率仍然很高（20％至35％）。胃肠道营养可以直接进行。尽管CCl4被肝脏吸收，但是它具有很大的胃肠道反应，并且很容易损坏食道。尽管蒸气吸入法吸收很快，但它对呼吸道有高度刺激性，对中枢神经系统有剧毒，并且不能耐受动物。混合进料方法可以将发霉剂溶解在少量食物中。由于其快速的口服摄入，可以控制浓度并减少或减少饮食。尽管这是对消化道的刺激，但由于动物食欲的影响，很难掌握实际的摄入量，实验周期长，终点不明确。