动物造模,肌炎动物模型 中国实验动物信息网 2022-02-06 1870

　　多发性肌炎（polymyositis）是一种常见于神经肌肉疾病中的自身免疫性疾病。异常的细胞介导的免疫和体液免疫在肌肉组织损伤中起重要作用。

　　1大鼠肌炎模型

　　（1）复制方法收集豚鼠的骨骼肌，用刀式匀浆器匀浆以制备肌球蛋白，然后将其放在脚掌，后背两侧和成年刘易斯老鼠的山脊。 5点钟，皮下注射完全的弗氏佐剂（CFA）和等量的肌球蛋白悬浮液。免疫力为每点1 ml/kg体重，并且连续4周每周进行一次免疫。同时，将0.5ml百日咳博德特氏菌的未稀释溶液注入腹腔中，细菌数为4.0×10至10次方。

　　（2）模型特征大多数模型大鼠表现出诸如活动迟缓，摆动，不适，虚弱，呼吸急促，呼吸急促，向后抬起，头部下垂，饮食减少和生长缓慢等症状。免疫4周后。在光学显微镜下，肌肉纤维表现出不同程度的变性，细胞质变得浑浊和肿胀，肌肉纤维的水平条纹模糊或消失，分散，并且在肌肉组织中存在局部的淋巴细胞和单核细胞。在间质中被萎缩。组织切片的酶组织化学染色显示心肌细胞中线粒体代谢异常，而ATPase显示I型和II型肌肉纤维均参与。大鼠血清中针对肌球蛋白的特异性抗体的含量明显增加。伴刀豆球蛋白A诱导的T淋巴细胞增殖是明显的。

　　（3）过去的比较医学研究报告说，不同的学者使用兔子，豚鼠，人和鸡对骨骼肌匀浆的大鼠进行免疫。比较结果表明，豚鼠和人的骨骼肌都进行了免疫。动物的肌炎症状更为严重。用这种模型建立方法，用豚鼠骨骼肌肌球蛋白对大鼠（刘易斯大鼠，近交系，对自身免疫反应敏感）进行免疫，并用弗氏完全佐剂在体内产生特定的免疫反应。这会产生肌肉抗体。同时，豚鼠骨骼肌和大鼠骨骼肌具有抗原交换，*终形成了实验性肌炎的模型。从动物的临床症状和病理活检来看，它类似于人多发性肌炎。实验表明，腹膜内注射百日咳博德特氏菌原液对大鼠的炎症反应比简单的皮下注射肌球蛋白和弗氏佐剂的乳化更为乳化。该物质更严重，与先前的几项研究中腹膜内注射百日咳博德特氏菌毒素的实验结果一致，但具体的作用机理尚不清楚。在多发性肌炎的病因学中，细胞介导的免疫和体液免疫的异常对肌肉具有不同的影响，其中以细胞介导的免疫为主要。通过这种方法产生的肌炎模型表明，模型动物的肌肉组织具有炎性细胞浸润，肌纤维变性和坏死，并且建模过程涉及细胞介导的免疫反应。该结果归因于免疫形成的肌球蛋白。就职。伴刀豆球蛋白A是一种T淋巴细胞刺激剂，可通过非特异性激活多克隆T细胞来增强人体的整体T细胞免疫力。因此，伴刀豆球蛋白A诱导的T淋巴细胞的增殖代表了人体T细胞的整体免疫功能。

　　2几内亚猪肌炎模型

　　（1）复制方法首先，使用新鲜的兔骨骼肌制备肌肉匀浆。剪断肌肉，加入pH7.2ψ（H3PO4）= 20％的缓冲液，然后在冰水浴中用刀切开。均质机均质化。以1700r/min的速度运行3次，每次5秒，间隔30秒。接下来，用4层纱布过滤，并用磨浆均质机以30秒的间隔将滤液以3000r/min的速度匀浆3次，每次5S。加入去污剂Triton-X-10，两者的比例为100：1、将混合物在25009 x 10分钟（4°C）下离心，并将上清液制成-20℃冰箱中的肌肉匀浆器°C在实验之前，将肌肉匀浆与完全弗氏佐剂2：1混合，并每周在豚鼠的颈背皮下注射（0.2 ml肌肉匀浆和0.1 ml完全弗氏佐剂），持续8周。

　　（2）模型特征注射后1-2天，注射区域有0.5-1 cm硬结节，发红和肿胀，1周后，结节变软，起伏，溃疡，一个体温升高并变得*高在2周内引人注目。伤口在4周内开始愈合，肿块逐渐变小，并在8周内变成硬肿块。 4-6周后，活动度，体重减轻和皮毛颜色变暗都有不同程度的下降。注射后4周血肌酶（CK，LDH，AST）升高，并在6-8周达到高峰。肌电图表明，电动机的时限显着减少，振幅减小，多相波增加。免疫后第4、6和8周组织组织。通过体格检查发现以骨骼肌多发性炎症为特征的病理变化：在显微镜下，纹状体肌肉局部变性，坏死，并且炎症细胞分布在浸润，增厚的肌肉细胞中。间质小血管壁和周围炎性细胞的浸润。在电子显微镜下，肌原纤维的亮带和暗带消失，肌原纤维肿胀，破裂，液泡，线粒体凝结，液泡，肌肉束之间的间隙变宽，提示肌肉萎缩。

　　（3）比较医学当人类发展为多发性肌炎时，血清肌酶水平升高，肌电图显示肌原性损害，在显微镜下检查的组织病理学特征主要是肌肉，纤维变性，坏死和炎性细胞浸润。兔骨骼肌和豚鼠骨骼肌具有抗原性串扰。通过用兔骨骼肌匀浆和完全的弗氏佐剂多次免疫豚鼠建立的实验性肌炎模型具有肌肉酶，肌电图和组织病理学的优点。对于人类肌炎。