动物造模,外伤后癫痫动物模型 中国实验动物信息网 2021-11-15 965

　　1.建模材料动物：Wistar大鼠，雄性，体重200-250g，药物：异戊巴比妥，FeCl3溶液，设备：大鼠立体定位系统，无线蓝牙EEG监测系统，高速牙钻，牙托粉，微型注射器。

　　2.建模方法称重后，通过腹膜内注射2％的异戊巴比妥溶液（50 mg/kg）麻醉大鼠，并固定在立体定向固定装置中。剪掉冠上的头发，定期对冠上的皮肤进行消毒，然后沿着头的中线剪下冠。切口的长度约为3厘米。剥去头部上方的筋膜以露出头骨。用高速牙钻在左颅骨冠状缝线后3毫米处和矢状缝线旁边2毫米处钻一个2毫米直径的孔。另外，在直径为2 mm的孔上打5个孔，以放置电极。孔的位置遵循D'Ambrosio使用的方法。换句话说，原点是渗泉，矢状缝合线穿过Y轴并通过原点，垂直于Y轴的直线是X轴，坐标轴的单位是mm。孔的坐标为（4,0），（4、-6），（-4,0），（-4、-6），*后在中心制作一个直径2mm的孔。额骨（图1.1）。使用微注射器，在5分钟内以3 mm的针头穿透深度均匀地将5μl浓度为100 mmol/L且pH为1.5的FeCl3溶液注入大鼠感觉运动皮层。注入溶液后，握住针头5分钟以防止液体溢出。

　　脑电图记录：将一根钝的纯银线放在带有电极的孔的硬脑膜上，并用牙粉将银线固定到颅骨上。银线的另一端连接到无线蓝牙EEG监视系统，以监视大鼠的EEG。

　　3.铁模型原理具有引起癫痫的作用。

　　4.模型构建后的变化麻醉期间，大鼠有时会轻微颤动，并且基本上没有自发活动。建立模型后约2.5小时，大鼠开始发作。攻击的形式是将头部向右倾斜，围绕尾巴的底部顺时针旋转身体，持续时间约为0.5到1分钟。在将近三个小时内，大鼠开始出现典型的史诗性癫痫发作。攻击的形式是将身体向右扭动，抬起上身，弯曲整个身体使其变硬，猛烈挤压四肢，将其翻身并跳跃，跳跃的高度约为20至30厘米。同时，可以看出大鼠的眼睛被撕裂，眼球向外凸出，并伴有尿失禁。癫痫发作持续约1分钟。攻击后，鼠标躺下休息并瘫痪。大约5-10分钟后，鼠标恢复正常活动。建立模型后的3-5个小时内，每10-20分钟发生一次癫痫发作。建立模型后的6-8小时内，大鼠的癫痫发作频率逐渐降低至每0.5-1小时一次。在壮观的癫痫发作中，大鼠进行自动咀嚼交叉。建立模型后的24小时至一周内，大鼠的癫痫发作频率降低，每天约一次癫痫发作，主要表现为咀嚼自动化和身体不自主抽筋。建立模型两周后，大鼠癫痫发作的频率进一步降低，大约每2-5天一次。

　　模型建立三小时后，出现了频率明显快于背景波且振幅明显高于背景波的尖峰波。在左侧注射部位的感觉运动皮层区域发生癫痫波。同时注射侧另一侧的感觉运动皮层面积明显，出现癫痫波，大鼠的行为症状变得僵硬，四肢抽搐；该日主要是突波和尖锐波浪，伴间歇性癫痫发作。零散的尖波和尖锐的慢波活动。

　　5.注意事项实验期间，大鼠的体重应尽可能在所需范围内。这种类型的大鼠具有很高的耐受性，并且易于通过立体定向固定装置固定头部。注射速度和针头保持力也很重要。手术器械要严格消毒。手术创伤应尽可能小，并且手术应严格无菌以防止手术感染。钻颅时要注意深度，如果有颅骨，要立即停下来。这是防止大量出血的突破。外科手术后，可以将大鼠分开并唤醒3-5小时，然后将其置于笼中以防止*只被唤醒的大鼠舔食或咬伤失去知觉的大鼠的伤口。在繁殖室内，尽可能保持老鼠的*佳温度和湿度。