目的:研究脂肪干细胞(ASCs)分化为内皮细胞的能力,并将其与骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行比较。
方法:从SD大鼠中分离并培养ASC和BMSC,选择特定世代的生长细胞,并通过流式细胞术鉴定细胞表面标志物。使用CCK-8方法绘制细胞增殖曲线。使用qPCR检测内皮细胞特异性标记CD31、KDR,vWF mRNA的表达3周;使用免疫荧光染色观察表面抗原CD31的表达; Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)用于检测表达诱导组细胞摄取功能;验证诱导组细胞在Matrigel上形成管的能力。
结果:成功分离并培养了大鼠ASC和BMSC。就形态而言,ASC和BMSC的形状相似,均表现出长纺锤状,纺锤状和成纤维细胞状形态。流式细胞仪检测结果表明,这两种BMSCs均为ASC,分别是造血干细胞的表面标志物,高间充质CD29(100%和96.9%),CD90(96.5%和99.2%)和造血细胞的表面标志物,我表达了一些CD45、 (3.9%和0.8%)。是低表达的,证实是提取的间充质干细胞。 CCK-8生长实验结果表明,ASC的生长速度快于BMSC(P\u003c0.05)。经标准内皮细胞诱导后,qPCR结果显示,诱导组BMSC和ASC中CD31、KDR和vWF mRNA的表达高于非诱导组(P\u003c0.05)。免疫荧光染色显示CD31抗原在细胞上表达。诱导组的膜表面;荧光显微镜下Dil-Ac-LDL诱导组的细胞摄取(非诱导组无摄取);诱导组细胞具有在Matrigel上形成管并被诱导的能力,这些细胞是内皮细胞。
结论:BMSC和ASC均能诱导内皮细胞分化,ASC在较短的时间内可广泛分化为内皮细胞,并具有更强的增殖能力,并且ASC的用途比BMSC更多。