目的:建立鼠诺如病毒的实时荧光定量PCR检测方法,为建立MNV标准化检测方法提供依据。
方法:根据NCBI公布的60株MNV毒株的核酸序列设计特异性引物,构建标准的阳性质控品,建立MNV实时荧光定量PCR方法和特异性,评价灵敏度,重现性和稳定性。该方法用于检测766例接受测试的小鼠的盲肠含量样本,并初步了解北京实验小鼠的MNV感染状况。
结果:我们已经成功建立了MNV实时荧光定量PCR检测方法。该方法具有高度特异性,并且不会与人类诺如病毒(HuNoV)和猫杯状病毒(FCV)的同一物种发生交叉反应。检测灵敏度。可以达到101份/μL。批内和批间CT值的变异系数小于2%。使用此方法,在766个小鼠盲肠含量样品中检测到301 MNV核酸阳性样品,阳性率为39.3%。
结论:已建立的MNV实时荧光定量PCR检测方法具有优异的特异性,高灵敏度和良好的重现性,可用于MNV的快速定量检测。