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如何建立猴免疫缺陷病毒抗体免疫梳检测方法?-【动物造模】

  目的:通过基因工程技术制备猿猴免疫缺陷病毒(SIV)的SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立特异性检测实验猴血清中抗SIV抗体IgG的免疫梳方法(IC)。

  方法:使用原核生物的表达载体pGEX-4T-1为SIVSIV30基因构建重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达。纯化重组蛋白并将其用作诊断抗原,以建立针对免疫梳的标准化检测程序。您是否将其应用于临床试验?

  结果:*佳抗原包被量为0.02 mg/mL。制备的IC可以特异性检测相应的SIV阳性血清,而不会与其他病毒血清发生交叉反应,这表明该检测方法具有很强的特异性。敏感性分析结果表明,SIV30蛋白可以高灵敏度检测1:400稀释的SIV阳性血清。稳定性和重现性测试结果表明,同一样品已重复测试了3次,变异系数(CV)小于10%。使用这种检测方法检测10个可疑猴子血清样品时,IC和ELISA结果匹配率为100.0%,kappa = 1:000?

  结论:SIV30蛋白的原核表达,IC制备和临床应用测试?这个测试?该方法高度灵敏吗?特异性强吗?出色的可重复性和出色的实用性?

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