动物造模,原代小肠上皮细胞模型 中国实验动物信息网 2021-05-26 941

　　目的：探讨树鼩初级小肠上皮细胞的增殖特性，建立人可旋转的G1P [8]病毒感染树鼩初级小肠上皮的体外细胞模型。

　　方法：通过胶原酶XI和中性蛋白酶I的组合消化，获得树sh原代小肠上皮细胞。纯化和鉴定后，细胞被人可旋转的G1P [8]病毒和病毒滴度感染。通过Western印迹和间接免疫荧光检测法检测人轮状病毒G1P [8]型VP6蛋白的表达，并测定人轮状病毒G1P [8]型病毒对图派原代小肠上皮细胞的感染性。在体外进行了评估。

　　结果：通过传代培养纯化了树sh的分离的原代小肠上皮细胞，并获得了纯度为90％的树sh的原代小肠上皮细胞。比较树小肠原代小肠上皮细胞，原代肾细胞，HCT116细胞和MA104细胞的轮状病毒敏感性，并确定树小肠原代小肠上皮细胞可被人轮状病毒G1P感染[8]。]。病毒滴度可达到2.0 x 105 TCID 50/mL。 Western印迹和间接免疫荧光显示，在轮状病毒G1P [8]病毒感染1-5天的图帕人小肠上皮细胞中，可以检测到轮状病毒VP6蛋白的表达和分布。

　　结论：建立了分离，纯化和培养树sh初级小肠上皮细胞的方法，并建立了人可旋转的G1P [8]病毒感染树sh初级小肠上皮细胞的体外模型。