动物造模,闭合性大鼠胫骨骨折模型 中国实验动物信息网 2021-12-23 1858

　　背景：基于Bonnarens等人先前设计的模型，描述了大鼠骨折模型。在该模型中，在骨折前从膝关节逆行植入髓内钉（IM）。然后，它掉入固定重量的钝头断头台骨中，形成标准化的闭合性股骨中央骨折。几项研究报道了使用钝头斩首的大鼠股骨骨折模型中的反复并发症，包括死亡，骨折错位，过度磨削和深层感染。另外，在骨折愈合过程中，不同程度的骨折愈合特别困难。骨折的粉碎程度影响愈伤组织的形成，大鼠骨折模型与粉碎的愈伤组织的形成具有一定的相关性。用大鼠胫骨骨折模型确认骨折的结果是，压溃程度较小，但骨量明显移动，并且针尖角超过10°。在大鼠胫骨骨折模型中使用三点钳显示出*小的水肿和死亡，但骨折后6个月胫骨骨call明显减少，针角为80±2°。由于现有骨折模型的局限性，因此需要一种可行的，可再现的和可靠的骨折模型，尤其是在实验室动物中。方法：动物：使用10只30周龄大鼠和71只8周龄大鼠。如下所述，将三点弯曲钳用于骨折。体内研究共使用25只（n = 25）8周龄雌性Sprague-Dawley大鼠，平均体重为187.04±10.15克。体内研究共使用25只（n = 25）8周龄雌性SD大鼠，平均体重为187.04±10.15克。实验开始前有一个为期一周的适应期。适应期后，在手术前将大鼠禁食12小时。

　　手术：所有手术均在麻醉前用氯胺酮和甲苯噻嗪进行。肌内注射氯胺酮（40 mg/kg）和甲苯噻嗪（5 mg/kg）后，对每组大鼠进行手术并进行X线照片。使用4毫米皮肤切口进行手术切口，并使用手术刀刀片（＃15）进行膝关节的手术切除。胫骨暴露于不锈钢中，胫骨，颅骨连接至前十字韧带和半月板的前角，并手动引入锋利的探针以确定髓内针入口的面积。将23G，11/2“针插入胫骨远端，针的穿透深度约为22毫米。在髓内钉完全穿过胫骨后，使用骨刀将近端再切开。将切口切开。 4/0用尼龙缝合线闭合通过改良Otto等人的上颌压迫颌骨来改变大鼠的胫骨骨折而得到了特别改进，我们构造了一个3点弯曲钳，其直径为10 x 0.1 mm尺寸相同；更改三点弯曲钳；将两个支撑爪从17 mm更改为7 mm；使用钳子后目视定位；控制并关闭钳子直到听到裂痕；然后立即释放压力。根据上述原理建立大的大鼠胫骨或股骨骨折模型，对照组的左侧胫骨骨折和右侧的胫骨均完好无损，对照组，将每只动物放在单独的笼子中以允许手术后自由活动，在使用Tramadol的同时进行手术后每天5 mg/kg，连续3天作为镇痛药，通过腹膜内注射20mg/kg戊巴比妥对动物实施安乐死并进行放射学观察

　　常见于骨折评级：由于骨折是在骨折的骨头中预先用髓内针预先固定，该骨折被认为是稳定的，不需要在手术后增加外部支撑绷带，胫骨是诱发性骨折，并从未截肢的四肢收集（对照）5术后1、2、3、4和6只大鼠死于周围（n = 5），解剖并控制胫骨，使用解剖立体显微镜，其盖盖指数为3.1μm像素，且骨call区域为，测量大鼠的胫骨骨折和胫骨骨折愈合后的骨call宽度（毫米）对面，作为外侧大鼠的正确胫骨对照，使用IMAGE软件测量卷曲指数的比值，cals面积，cals指数，针头使用相同的软件测量角和邻近度；端部骨折，总长度；对骨折和正常对照骨进行径向评估；  骨折放射学：使用X射线对与骨折相对的完整胫骨进行两角度X射线检查手术后立即使用该设备，手术后每周一次拍摄骨关节，骨call形成，骨碎裂，针角，X射线骨call指数等指标X射线骨us指数是胫骨中部骨call的*大宽度，包括原始骨骼，在对侧对照骨骼的宽度处。这是分裂的。压碎的骨折是指骨头分裂或破坏成两块或更多块。首先，之前和之后的两个图像都不会受到挤压。然后将小块压碎。它的大小小于钉子的直径。\u003c1.1mm;第三、它被严重压碎（大于髓内钉直径的大块）。骨折的组织学检查：在手术后第1、2、3和4周处死动物，每周从骨折的四肢上取解剖学上的胫骨标本（n ＝ 5）。在骨折部位（明显形成愈伤组织）下，将骨头切成2毫米并用10％甲醛固定24小时。脱钙10％。施用甲酸4天，然后处理并用H＆E标准品染色。结果：一项对30周龄大鼠（n = 10）的初步研究表明，胫骨骨折主要是被磨碎，倾斜和分离的。中位数占主导地位。在8周龄的大鼠（n = 65）中，结果表明：胫骨的主干在横轴和中轴上未压扁。另一只8周大的大鼠（n = 6）用于比较股骨和胫骨骨折的类型。股骨和胫骨骨折的主要类型是位于骨中心轴的外侧和非粉碎性骨折。体内研究发现，在第三胫骨中部所有诱发的骨折。平均驾驶时间为3.90±0.55分钟。所有动物均在手术中幸存下来，没有并发症，骨折部位的软组织损坏或相邻的膝盖和踝关节僵硬。骨折部位没有坏死或严重水肿的迹象。骨折后二十四小时，大鼠表现正常。一两个星期后，老鼠开始在患肢上加重。两周后，所有老鼠开始在所有四个爪子上称重。在*周观察到愈伤组织形成，并在第六周逐渐减少。通过放射线测量骨折线和胫骨长轴之间的夹角来确定骨折的类型。骨折的主要类型是外侧骨折（89.41±2.11）。近端骨折的平均长度为41.02、占完整骨平均长度的±3.27％。 IM针在外侧和前后位置的平均角度分别为167.33±3.67°和161.47±4.87°。在X射线胶片上清晰可见骨折部位周围的愈伤组织的形成。愈伤组织密度在3-4周内增加，从而难以观察骨折线。骨折线在第4周消失，骨折完全愈合。在*周，X射线愈伤组织指数几乎无法测量，在第二周，它很小且几乎看不见。它在第3周达到*高点，并在第4周和第6周逐渐下降。在4只动物中观察到轻度的粉碎性骨折，在其余动物中未观察到粉碎性骨折。骨折后的组织学检查显示，骨折后*周血肿和软骨细胞增生，第二周软骨细胞面积和松质骨增加。在第3和第4周，松质骨随着肥大软骨细胞和骨髓的出现而增加。结论：这项研究中使用的改进的三点弯曲钳对于在大鼠中产生很少并发症的可复制闭合性骨折非常实用。