肢体缺血再灌注损伤 中国实验动物信息网 2021-07-13 1333

　　目的：靶向雷帕霉素抑制mTOR并研究其对大鼠心脏瓣膜间质细胞增殖的影响。

　　方法：体外分离、培养和鉴定大鼠瓣膜基质细胞。将细胞随机分为两组：雷帕霉素组和对照组。采用MTT法检测并绘制大鼠瓣膜间质细胞生长曲线。后处理；流式细胞术检测雷帕霉素对细胞周期的影响；RT-PCR检测细胞内S6和P70 S6K mRNA表达水平；检测S6、P70 S6K和P细胞中S6的表达水平Western blotting和P-P70S6K蛋白为了。

　　结果：体外分离的大鼠瓣膜基质细胞成功分离培养。对照组细胞活性明显高于加药组(Pu003c0.05)。药物流式细胞仪细胞活性显示，加药组细胞比例无明显差异。在对照组的每个循环中，添加药物组 S6 和 P70 显示出 S6K 蛋白磷酸化水平降低 (P)。 u003c0.05）。 \n结论：雷帕霉素能抑制瓣膜间质细胞的增殖。原因可能是mTOR抑制后靶蛋白S6和P70S6K的磷酸化水平下调，而不是细胞周期变化。 \n 目的：探讨止血带缺血再灌注损伤后血小板线粒体的变化，为止血带的临床应用提供指导。

　　方法：将30只SD大鼠随机分为对照组（6只）、缺血再灌注组（24只，再随机分为4组，分别在2、6、12、24小时后采血。 ）。再灌注。检测）。大白兔大腿根部（压力280 mmHg）用自制止血带包扎模拟止血带缺血，4小时后松开止血带。在相应的时间点，抽取血液以分离血小板。使用自动血小板计数器测量血小板计数；使用荧光素-荧光素酶试剂盒测量血小板 ATP 含量；使用 JC-1 线粒体膜电位试剂盒 (△ ym) 检测血小板的变化；使用细胞色素 C 凋亡试剂盒检测血小板的细胞色素 C 含量；脂质过氧化物试剂盒，用于检测血小板中的脂质过氧化物。

　　结果：与对照组相比，缺血再灌注损伤组血小板ATP含量在2小时和6小时显着降低（P\u003c0。05）。两组血小板计数差异无统计学意义（P\u003c0.05）。

　　结论：止血带缺血再灌注损伤可导致血小板线粒体功能受损，主要发生在缺血再灌注早期（6小时），后期逐渐恢复。