目的:探讨加味丹参汤对体外骨髓间充质干细胞(bone Messechymal stem cells BMSC)向心肌样细胞分化的影响。
方法:采用贴壁法获得大鼠BMSC,流式细胞仪检测细胞表面抗原。 MTT法检测加味丹参汤对BMSC的*大无毒浓度。由第3代细胞(正常对照组、加味丹参汤组、5-阿扎胞苷组、加味丹参汤+5-阿扎胞苷组)诱导。 Western blot检测各组细胞结合蛋白(desmin)、α-肌球蛋白重链(α-MHC)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)蛋白表达,RT-PCR检测GATA-4、gap表达每组 Conexin 43 (CX43) 和kx2-5 mRNA。
结果:大鼠骨髓间充质干细胞表面CD90阳性率高于95?CD34和CD45阳性率低于5?加味丹参饮料在BMSC的*高无毒浓度为0.625g/L。加味丹参汤组、5-阿扎胞苷组、加味丹参汤+5-阿扎胞苷组desmin、α-MHC、cTnT蛋白表达较正常对照组上调,GATA-4、CX43、Nkx2 -5 mRNA表达水平上调,差异有统计学意义(Pu003c0.01)。与加味丹参汤组或 5-氮杂胞苷组、GATA-4、CX43 和kx2-5 相比,加味丹参汤 + 5-氮杂胞苷组 Desmin、α-MHC 和 cTnT 蛋白的表达上调。mRNA 为上调且差异有统计学意义(Pu003c0.01)。
结论:加味丹参饮能诱导BMSC转化为心肌样细胞,与5-阿扎胞苷联用有协同作用。