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【动物造模】-ripply1在斑马鱼早期胚胎背腹发育中的作用

  目的:探讨ripply1基因在斑马鱼早期背腹轴发育中的作用。

  方法:利用斑马鱼全包囊原位杂交技术,揭示了斑马鱼早期胚胎发育中ripply1基因的表达模式,并利用显微注射技术在胚胎1细胞期产生ripply1 mRNA,注入高表达Ripply1蛋白.观察阶段胚胎背腹标记基因的变化和胚胎的形态变化。使用Tol2转基因技术,我们构建了由ribply1启动子驱动的GFP转基因鱼。

  结果:原位杂交结果表明,ribply1基因在斑马鱼胃的早期胚盾阶段,即给定背部的胚盾中特异表达。ipply1高表达后,胚盾期后标记基因表达范围扩大,腹部标记基因表达减弱。受精后二十四小时,胚胎表现出严重的背侧表型:头部增大,腹部卵黄延伸减弱,尾躯干和尾部增大,面积缩小,第二个体有的甚至形成轴。由此产生的转基因鱼揭示了ipply1 的母体表达,由转录起始位点上游 1200 个碱基驱动的 GFP 可以模拟内源基因的表达模式。

  结论:Ripply1可能参与了斑马鱼胚胎早期背腹轴的发育。

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