动物模型,细菌性角膜炎,动物造模 中国实验动物信息网 2022-02-24 1580

　　[建模机理]角膜基质占角膜厚度的90％，由100至200层规则排列的胶原纤维组成，并且在角膜层状纤维之间具有少量内源性角膜细胞。当角膜受损并发炎时，这些细胞被诱导演变为成纤维细胞，并可以参与受损区域的修复。角膜是无血管的，其营养来自房水，泪膜和角膜缘毛细血管。在细菌性角膜炎（细菌性角膜炎）中，处于损伤的炎性阶段的上皮细胞和实质细胞也释放蛋白水解酶，引起溃疡的加深和扩散。结膜和泪腺也参与炎症反应，表现为结膜肿胀和充血，淋巴细胞，单核细胞和嗜中性粒细胞增加，并且泪液可以冲洗结膜囊和角膜表面。眼泪含有一些杀菌的溶菌酶和免疫球蛋白。但是，身体修复的速度与角膜损伤的程度，细菌的毒性以及感染细菌的数量有关。铜绿假单胞菌目前是眼科中*具致病性的细菌。细菌产生多种分解酶，引起局部组织分解，引起人体对细菌的炎性反应，甚至破坏和破坏角膜组织。

　　[建模方法]选择一只体重约2.0公斤的健康兔子，对雌雄没有任何限制。在建模之前，请执行外部视觉检查，并使用正常的进行建模。在创建模型之前，请准备细菌接种物。在普通琼脂培养基上接种4°C冰箱中储存的铜绿假单胞菌，并于36°C孵育24至48小时。使用铂金耳环刮擦菌落，并用生理盐水准备。浓度为2 x 1000000000/ml（浓度由光电浊度计测量）。创建模型时，丁卡因对兔眼进行了局部麻醉，即使用角膜精按压角膜也没有反应，因此请轻轻按压角膜并将其顺时针旋转，然后用直径7 mm和4 mm的角膜环戊四酸环绕。造成外伤。将眼皮拉成杯状，并使用1 ml注射器，将2 x 1000000000/ml细菌滴入0.1 ml /只兔子的眼睛，以感染一只眼睛。二十四小时后，观察并连续七天记录眼部症状。

　　0级：眼睛明亮，没有分泌物。 0.5级：分泌物被发现，眼睛略带红色和肿胀。级别1：分泌范围小于6毫米。级别2：分泌物范围达到6毫米。 3级：分泌范围大于6毫米。 ..

　　感染后第1、3和5天，使用感染的无菌生理盐水拭子收集感染和对照眼睛的分泌物，并放入4 ml生理盐水中。混合（待测溶液）。将1毫升测试溶液吸取到无菌陪替氏培养皿（直径90毫米）中，加热融化，然后将冷却至约45°C的营养琼脂倒入15毫升陪替氏培养皿中，顺时针轻轻摇动，使其冷凝。放置在36°C的恒温箱中24小时。 ，确定细菌为阴性还是阳性。

　　[模型特征]接种后24至48小时，患眼有大量的淡黄色分泌物，严重的结膜充血，角膜混浊，闭眼和脓性分泌物，使眼睑发粘而温和。覆盖整个角膜的虹膜瞳孔几乎看不见，虹膜瞳孔消除了兔眼的分泌物。除了在第5天得分为2.0的一些眼睛外，大多数眼睛的评分可以达到3.0。细菌培养结果：接种后第1、3和5天分泌培养阳性。角膜病理切片显示，角膜高度水肿和混浊，在基质的前1/3处发现大量嗜中性粒细胞，淋巴细胞，成纤维细胞和坏死组织。上皮下溃疡未愈合。在角膜基质中发现了新血管，在某些区域还出现了角膜穿孔和前房积脓。虹膜的血管扩张，充血，并被大量炎性细胞浸润。  [模型的评估和应用]一种使用角膜环戊烷破坏角膜的方法，该方法易于操作且易于学习。但是，由于模型构建器技术的严重程度不同，角膜损伤的深度是可变的，并且根据评分标准将实验组平均分组，从而显着地区分了每组动物模型的炎症程度。没有。以这种方式建立的动物模型适用于抗菌药物的临床筛选。